黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告10篇黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告 实验报告 专业班级 学号 实验课程名称 开课实验室 姓名 同组人 实验项目名称 实验时间 评分 指导老师 一、下面是小编为大家整理的黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告10篇,供大家参考。
篇一：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
实验报告专业班级
学号
实验课程名称
开课实验室
姓名
同组人
实验项目名称
实验时间
评分
指导老师
一、实验目的
掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。
二、实验原理
有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们得以分离。物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值Rf表示。
三、实验仪器与药品
5.0cm×15.0cm硅胶层析板两块，卧式层析槽一个，点样用毛细管。
四、物理常数
名称
分子量
熔点/℃
沸点/℃
300
未确定
折光率/n201.6266
比重
1.2032
颜色和形态
橙红色鳞状晶体或粉末
溶解度
微溶于水，较易溶于热水，不溶于乙醇
不溶于水，乙醚，氯仿和苯，溶于碱液。
甲基橙
327.33
荧光黄
332.31
未确定
未确定
未确定
-——
橙红色结晶粉末
五、仪器装置图
“浸有层析板的层析槽”图
1-层析缸，2-薄层板，3-展开剂饱和蒸汽，4-层析液
六、实验步骤
（1）薄层板的制备：
称取2～5g层析用硅胶，加适量水调成糊状，等石膏开始固化时，再加少许水，调成匀浆，平均摊在两块5.0×15cm的层析玻璃板上，再轻敲使其涂布均匀。（老师代做！）
固化后，经105℃烘烤活化0.5h，贮于干燥器内备用。
（2）点样。
在层析板下端2.0cm处，（用铅笔轻化一起始线，并在点样出用铅笔作一记号为原点。）取毛细管，分别蘸取偶氮苯、偶氮苯与苏丹红混合液，点于原点上（注意点样用的毛细管不能混用，毛细管不能将薄层板表面弄破，样品斑点直径在1~2mm为宜！斑点间距为1cm）
（3）定位及定性分析
用铅笔将各斑点框出，并找出斑点中心，用小尺量出各斑点到原点的距离和溶剂前沿到起始线的距离，然后计算各样品的比移值并定性确定混合物中各物质名称。
纯染料
混合染料
甲基橙
荧光黄
甲基橙
荧光黄
混合液
斑点移动距离a
（cm）
溶剂移动距离b
（cm）
Rf
实验注意事项
1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。
2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。
3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端0.5－1cm时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。
讨论：
七、思考题
篇二：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
关于薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连及香连丸中盐酸小檗碱的含量【摘要】
目的
建立黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法
样品经提取、薄层展开后，采用薄层色谱-荧光分光光度法对黄连和香连丸中盐酸小檗碱进行含量测定，展开剂为苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)，激发波长Ex＝365nm，发射波长Em＝409nm。结果
盐酸小檗碱在0.473～3.784μg范围内线性关系良好，r＝0.9993。黄连的回收率为99.03%，RSD＝1.86%。香连丸的回收率为97.10%，RSD＝1.09%。结论
该法操作简便，分离效果好，灵敏度高。
【关键词】
黄连；香连丸；荧光分光光度法；盐酸小檗碱；含量测定
Keywords：CoptischinensisFranch.；XianglianPills；fluorescencespectrophotometry；berberinehydrochloride；contentdetermination
黄连为毛茛科植物黄连(CoptischinensisFranch.)、三角叶黄连(CoptisdeltoidesC.Y.ChengetHsiao)或云连(CoptisteetaWall.)的干燥根茎，具有清热燥湿、抗菌消炎、利胆等功效，临床上用于治疗消化道感染、泻痢等疾病。以黄连作原料的中成药香连丸气微、味苦，具有清热燥湿、行气止痛等功效，临床多用于湿热痢疾、里急后重、腹痛泄泻、菌痢、肠炎等症。盐酸小檗碱为两者共有的有效成分，具有抗菌、抗病毒、抗凝等作用，治疗原发性高血压、糖尿病等疾病。本试验采用薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量，为其质量控制提供依据。
1仪器与试药
RF-5000荧光分光光度计(日本岛津)，UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)，AG135(四川时运成套仪器有限公司)，80-2离心沉淀器(上海手术器械厂)，CQ-250超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。
盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号0713-9906)；黄连(贵州，批号20060424；四川，批号20060827、20070422)。药材经本校资源鉴定教研室姚振生教授鉴定为黄连CoptischinensisFranch.；香连丸(湖北诺得胜制药有限公司，批号061001、070101；湖北瑞华制药有限责任公司，批号060117)。硅胶G(青岛海洋化工有限公司，批号050428)；其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1对照品溶液和供试品溶液的制备
精密称定干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品4.73mg，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.473mg/mL的对照品溶液。
取黄连药材粗粉约0.1g，精密称定，置100mL容量瓶中，加盐酸-甲醇(1∶100)溶液约95mL，60℃水浴加热15min，取出，超声处理30min，室温放置过夜，加甲醇至刻度，滤过，滤液作为黄连供试品溶液[1]。
精密称取香连丸约0.4g，加适量盐酸-甲醇(1∶100)溶液，索式回流提取至无色，提取液置水浴上蒸至约20mL，定量转移至50mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为香连丸供试品溶液[2]。
2.2薄层分析条件[3]
用0.3%CMC-Na为粘合剂自制硅胶G板，取对照品溶液适量，点样后用氨水饱和30min，以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)为展开剂，展距10cm，晾干后置紫外光(365nm)下检视，盐酸小檗碱呈黄绿色荧光斑点(Rf＝0.40)。
2.3荧光条件的确定
取对照品溶液，用荧光分光光度计扫描，结果显示，盐酸小檗碱最大激发波长Ex＝365nm，最大发射波长Em＝409nm。
取对照品溶液1mL，分别加入不同体积的1mol/LNaOH溶液，并用甲醇定容至2mL，在Ex＝365nm、Em＝409nm处测定其荧光强度。结果表明，随着NaOH量的增加，其荧光强度不断增大，当加入50μL时荧光强度最大，此后继续增加NaOH用量时其荧光强度变化不大。故试验中确定NaOH加入量为50μL。
2.4线性关系考察
分别吸取对照品溶液1.0、2.0、4.0、5.0、6.0、8.0μL，间隔1.5cm依次点于同一硅胶G板上，按“2.2”项下条件展开，将相应斑点刮入离心管中，同行空白。各斑点用甲醇洗脱并将洗脱液依次转移至2mL容量瓶中，加入1mol/LNaOH溶液50μL，甲醇定容，摇匀，在Ex＝365nm、Em＝409nm处测定荧光强度，以荧光强度为纵坐标，盐酸小檗碱含量为横坐标，得回归方程为：Y＝10.337X－1.897，r＝0.9993，表明盐酸小檗碱在0.473～3.784μg范围内荧光强度与其含量线性关系良好。
2.5精密度试验
2.5.1同板精密度
精密吸取对照品溶液10μL，点于同一硅胶G板上，呈等距离的6个点，按“2.4”项下方法测定，结果RSD＝1.34%。
2.5.2异板精密度
精密吸取对照品溶液10μL，点于6个不同的硅胶G板上，按“2.4”项下方法测定，结果RSD＝2.55%。
2.6稳定性试验
取同一份对照品洗脱液，每隔20min测定一次荧光强度，连续测定7次，结果RSD＝1.50%，表明盐酸小檗碱在该条件下2h内稳定性良好。
2.7重复性试验
取黄连(批号20060827)和香连丸(批号061001)各5份，按“2.1”项下方法提取，并按“2.4”项下方法测定，结果黄连中盐酸小檗碱平均含量为8.04%，RSD＝1.49%；香连丸中盐酸小檗碱平均含量为3.47%，RSD＝2.39%。表明本法重复性良好。
2.8样品含量测定
精密吸取对照品溶液及黄连、香连丸提取液各10、20、10μL，分别点于同一硅胶板上，按“2.2”项下条件展开，将相应斑点刮入离心管中，加入甲醇1.5mL，振摇5min，超声15min，3000r/min离心10min，取上清液，置2mL容量瓶中，加入1mol/LNaOH溶液50μL，甲醇定容，摇匀，测定其荧光强度，平行测定3次。结果见表1。表1黄连和香连丸中盐酸小檗碱含量测定结果(略)
2.9加样回收率试验
精密称取已知含量的黄连约0.1g(批号20060827)及香连丸约0.4g(批号061001)，各6份，分别加入适量的盐酸小檗碱对照品溶液，按“2.1”及“2.4”项下方法操作，测定其含量，计算回收率，结果见表2。表2黄连和香连丸中盐酸小檗碱加样回收率试验结果(略)
3讨论
本试验曾分别采用乙醇和盐酸-甲醇(1∶100)溶液对样品进行提取，结果发现，采用乙醇提取时，小檗碱提取率不佳，在本试验薄层展开条件下，难以达到理想的分离效果；而采用盐酸-甲醇(1∶100)溶液提取时，黄连及香连丸中小檗碱与盐酸反应形成生物碱盐，使其溶解度增加，提取较为完全，且在本试验薄层展开条件下能较好的分离，故选用盐酸-甲醇(1∶100)溶液作为提取溶剂。
目前，盐酸小檗碱的含量测定方法有薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法等[4-5]，由于本试验样品成分复杂，干扰较大，采用薄层色谱法、紫外分光光度法进行含量测定往往背景干扰大，重现性差；而高效液相色谱法易造成色谱
柱的钝化。荧光分光光度法具有灵敏性高、选择性强、试验样品量少、设备简单的特点，适用于痕量成分的检测。本试验采取薄层色谱-荧光分光光度法，可以减少盐酸小檗碱衍生物等成分的干扰，简便、有效、回收率高，适用于黄连和香连丸的质量控制。
【参考文献】
1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社，2005.213.
[2]周华平，宋广聪，王仁英.薄层扫描法测定香连丸中盐酸小檗碱的含量[J].基层中药杂志，2000，14(5)：15－16.
[3]杨广德，杨二库，王嗣岑.薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连中小檗碱的含量[J].西北药学杂志，2000，15(4)：159.
[4]梁生旺.中药制剂分析[M].北京：中国中医药出版社，2004.115－118.
[5]桑
媛，张冬海.黄柏胶囊中小檗碱含量的分光光度分析[J].中国药业，2006，15(5)：50.
篇三：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
薄层色谱法实验报告文档编制序号：[KK8UY-LL9IO69-TTO6M3-MTOL89-FTT688]
实验报告
专业班级
学号
实验课程名称
开课实验室
一、实验目的
掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。
二、实验原理
有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们得以分离。物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值Rf表示。
三、实验仪器与药品
×硅胶层析板两块，卧式层析槽一个，点样用毛细管。
四、物理常数
名称
甲基橙
分子量
姓名
同组人
评分
指导老师
实验项目名称
实验时间
熔点/℃
300
沸点/℃
未确定
折光率/n20
荧光黄
未确定
未确定
未确定
比重
颜色和形溶解度
态
橙红色鳞微溶于状晶体或水，较粉末
易溶于热水，不溶于乙醇
-—橙红色结不溶于—
晶粉末
水，乙醚，氯仿和苯，溶
于碱液。
五、仪器装置图
“浸有层析板的层析槽”图
1-层析缸，2-薄层板，3-展开剂饱和蒸汽，4-层析液
六、实验步骤
（1）薄层板的制备：
称取2～5g层析用硅胶，加适量水调成糊状，等石膏开始固化时，再加少许水，调成匀浆，平均摊在两块×15cm的层析玻璃板上，再轻敲使其涂布均匀。（老师代做！）
固化后，经105℃烘烤活化，贮于干燥器内备用。
（2）点样。
在层析板下端处，（用铅笔轻化一起始线，并在点样出用铅笔作一记号为原点。）取毛细管，分别蘸取偶氮苯、偶氮苯与苏丹红混合液，点于原点上（注意点样用的毛细管不能混用，毛细管不能将薄层板表面弄破，样品斑点直径在1~2mm为宜！斑点间距为1cm）
（3）定位及定性分析
用铅笔将各斑点框出，并找出斑点中心，用小尺量出各斑点到原点的距离和溶剂前沿到起始线的距离，然后计算各样品的比移值并定性确定混合物中各物质名称。
纯染料
甲基橙
荧光黄
斑点移动距离a（cm）
溶剂移动距离b
甲基橙
混合染料
荧光黄
混合液
（cm）
Rf
实验注意事项
1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。
2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。
3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端－1cm时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。
讨论：
七、思考题
篇四：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
黄莲鉴定实验报告篇一：实验
黄连中小檗碱的提取、精制和鉴定
实验四
黄连中小檗碱的提取、精制和鉴定
一、概述
黄连系毛茛科黄连属植物黄连（coptischinensisEranch.）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床。
主要化学成分的结构及理化性质：
小檗碱为黄色针状结晶，mp为154℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
NHCHO
OCH33
3OCH3
季铵式（红棕色）醇式（黄色）
醛式（黄色）
N+
OCH3
OCH3
小檗碱（黄连素）
二、实验部分
（一）实验目的
1、掌握小檗碱的结构特点和理化性质，以及一般的提取精制方法。
2、掌握旋转蒸发仪的使用。
3、熟悉盐酸小檗碱的色谱鉴定和定性鉴定方法。
（二）实验原理
1、提取原理：小檗碱为异喹啉类小檗碱，结构中的氮原子以季铵盐形式存在，显一定程度的亲水性，因此游离小檗碱能溶与水(1:20)及乙醇(1:100)，热水或热乙醇中易溶，不溶于乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。盐酸小檗碱在沸水中溶解，在冷水中析出。
2、分离原理：小檗碱与酸所成的盐在水中的溶解度不尽相同，如硫酸小檗碱为(1:30)，酸性硫酸小檗碱为(1:100)，枸橼酸小檗碱为(1:125)，而盐酸小檗碱为(1:500)。本实验就是据游离小檗碱在水和乙醇中的溶解度较大，而其盐酸盐难溶于水的性质进行提取和精制的。
（三）实验药材、仪器与试剂
1、药材：黄连50g（每组）。
2、仪器：回流装置、水浴锅、冰箱、旋转蒸发仪、烧杯（250ml）、抽滤装置、滤纸、层析缸、滤纸、试管、电炉。
3、试剂：75%乙醇、95%乙醇、蒸馏水、10%盐酸、氯化钠、乙醇、氯仿-甲醇-1/10盐酸（1:1:1）、10%硫酸、漂白粉、10%氢氧化钠、丙酮。
（四）实验内容
1、小檗碱的提取
取黄连粗粉50g，加入400ml75%的乙醇回流1.5h，四层纱布过滤，药渣用95%乙醇300ml回流1h，四层纱布过滤，并用少量蒸馏水洗涤药渣，合并两次滤液和洗液，放于冰箱中。
2、小檗碱的浓缩
用旋转蒸发仪将小檗碱提取液浓缩至糖浆状（小于50ml，无醇味）。
3、盐酸小檗碱的制备
将浓缩液倒入100ml沸水中（换成250ml烧杯）煮沸至溶解（10min），趁热抽滤，在滤液中加10%盐酸，调制pH=2，加入氯化钠10g，放入冰箱析晶。
4、盐酸小檗碱的精制
（1）抽滤，得到盐酸小檗碱粗品。
（2）取粗品放入100ml沸水中，搅拌溶解，继续加热10min，趁热抽滤，滤液放置过夜。（滤取结晶，先用少量1%盐酸洗一次，再用少量蒸馏水洗数次，抽干，干燥后得到小檗碱精品。）
5、鉴定
（1）化学检识
①取盐酸小檗碱少许，加10%的H2SO42ml，溶解后加漂白粉少许，即显樱红
色。
②取盐酸小檗碱约50mg，加蒸馏水5ml，水浴加热，溶解后加10%氢氧化纳试液2滴，显橙色。溶液放冷过滤，取澄清滤液，加丙酮4滴，即发生浑浊。放置后，生成黄色的丙酮小檗碱沉淀。
（2）
纸层析鉴定
样品：1%醇溶液。（每组0.1g溶于10ml乙醇）
标准品：1%盐酸小檗碱醇溶液
展开剂：氯仿—甲醇—1/10MHCL(1:1:1下行)
显色：自然光下观察
（五）实验注意事项
1、提取时两次乙醇浓度不等，提醒学生不要加错。
2、漂白粉加少许即可，否则影响结果
3、纸条要保持平整，不靠壁。
（六）思考题
1、小檗碱为哪类生物碱，可以用什么方法提取？
2、回流与蒸馏的区别是什么？
3、小檗碱精制的原理是什么？
4、旋转蒸发仪使用时需注意哪些问题？
篇二：实验三
黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
实验三
黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（CoptischinensisFranch。），三角叶黄连（C。deltoideaC。Y。ChengetHsiao）或云连（C。teetoidesC。Y。Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。
目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。
R1R2R3R4R5
R1OR2O
R5
￡-OR3OR4
+
3CH3H
CH2CH3CH3CH3CH3HCH2CH2CH2CH23HCH3CH3CH3H
2345
小檗碱(Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。Mp.145℃至160℃即分解。
OCH3
H3N
H
OCH3
O
H
小檗胺
H3CO
H
CH3
游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：
小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。
一、实验目的
1.学会从黄连中提取、精制盐酸小檗碱的方法；2.学会小檗碱的化学与色谱检识方法。
二、实验原理
利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度，制得盐酸小檗碱。
三、实验内容
（一）盐酸小檗碱的提取1.润湿
取黄连粗粉50g置烧杯中，加0.3%硫酸约10ml润湿，放置30min
2.装筒（分次装入渗漉筒并排气）3.浸渍
用0.3%硫酸浸泡过夜4.渗漉
收集9—10倍量的渗漉液
等待空余时间：
10g硅胶G+30ml(0.8%CMC-Na)研匀，铺板
（二）分离
1.取渗漉液，加40%NaOH调PH至11～12，放置过夜；
2.抽滤，将滤液加浓盐酸调PH值2～3，加入6%NaCl，搅拌均匀，放置过夜；3.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱粗品。
（三）精制
1.将上述粗品放入25倍量沸水中，于水浴上加热使溶解，趁热过滤液在65℃时加浓盐酸调PH值2～3，放置过夜
2.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱精品。
（四）检识
1.取自制精制盐酸小檗碱50mg，加水5ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液2滴显橙红色，放冷，加丙酮4滴，即发生浑浊，放置后，生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱。
2.取自制精制盐酸小檗碱少许，加入稀硫酸8ml溶解，搅拌均匀，分置两支试管中，一支加漂白粉少量，即显樱红色；另一支加入2滴浓硝酸,也显樱红色。3.取自制精制
盐酸小檗碱少许，加稀硫酸12m1使溶解，分置于三支试管中，分别加入碘化汞钾试剂、碘化铋钾试剂及硅钨酸试剂，观察其产生的现象。4.盐酸小檗碱的薄层层析
吸附剂：硅胶G硬板(未活化)
样
品：①自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液
②盐酸小檗碱标准品乙醇溶液
展开剂：①氯仿－乙醇(9:1)
②甲醇－丙酮－乙酸(4:5:1)
显色剂：先置于紫外光灯(365nm)下检视，再喷雾改良碘化铋钾试剂，观察斑点颜色，并与标准品对照。
篇三：黄连中小檗碱的提取和鉴定
化工与材料工程学院
综合与设计性化学实验
实验类型：
设计型
实验题目：黄连中小檗碱的提取和鉴定
班
级：学
号：
姓
名：
实验日期：XX-10-29
【关键词】
黄连；盐酸小檗碱；提取工艺；溶剂回流法
；化学检识檗碱
前言
黄连为毛茛科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎。《中国药典》中黄连和盐酸小檗碱一直有收载，具有抗病原微生物、抗腹泻、抗炎和免疫促进以及降血压、抗
心律失常、降血糖等药理作用，用于急性肠胃炎、口舌生疮、烧烫伤、心率失常、高血压、糖尿病等疾病的治疗。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱、掌叶防己碱、黄连碱等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
一
实验目的
1、通过对黄连中小檗碱的提取，掌握一般天然产物的提取技术。
2、通过对小檗碱的鉴定，掌握一般生物碱的鉴别方法。
3、熟悉握小檗碱的化学性质和鉴定方法。
4、通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计
二
实验原理
小檗碱为黄色针状结晶，加热至110℃变为黄棕色，于160℃分解。盐酸小檗碱加热至220℃分解，生成红棕色的小檗红碱。mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
CHO
OCH33
3OCH3
季铵式（红棕色）醇式（黄色）
醛式（黄色）
小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
三
实验仪器与试剂
1仪器和材料
100ml圆底烧瓶冷凝管50ml,100ml烧杯各一个
10ml,25ml量筒各一个
铁架台1个布氏漏斗滤纸
滴管一个蒸发皿
小试管3个
2试剂与原料
黄连粉（6.0g）
体积分数为95%的乙醇（60ml）
浓盐酸
蒸馏水
碘化铋钾试剂
碘化钾试剂
硅钨酸试剂
四
实验内容（操作步骤）
1提取与分离
黄连粗粉6.0g，冷凝回流1.5h
（现象：黄连粉溶解
溶液微沸
呈红棕色）
加热蒸发
加1%的醋酸40ml加热
溶解
趁热抽滤
滤液滤渣
加浓盐酸至溶液浑浊（pH=1）
静置冷却
析出黄色针状晶体
水洗2-3次
精制
小檗碱晶体
(注：由于时间有限
最后未能得到析出的晶体)
2性质与鉴定
由于没能的到晶体
所以取少量小檗碱溶液分成三份
分别加入三支试管中：
再向第一支试管加入1-2滴碘化铋钾试剂，振荡
向第二支试管加入1-2滴碘化钾试剂，振荡
向第三支试管加入1-2滴硅钨酸试剂，振荡
鉴别试验现象记录：
五.实验结果
5.1收率：由于本实验的时间有限，最终未能得到
小檗碱晶体，无法算收率
5.2性质与鉴定结果：
六
讨论
1．盐酸小檗碱在热水、热乙醇中溶解度较大，在冷水、冷乙醇中溶解度小，所以本实验在水浴中加热回流，另外可以加入NaCl促进其析出结晶。
2．在精制小檗碱时，加入醋酸加热，溶解，要趁热过滤。因为小檗碱在酸性下放冷极易析出晶体
所以迅速抽滤
提高提取率。
3鉴定试验也可以漂白粉显色反应：小檗碱酸性水溶液中加漂白粉（或通入氯气），溶液即变樱红色。另外也可以采用薄层色谱检识小檗碱。
4滴加鉴定硅钨酸试液时加入量不能过多，加入1-2滴振荡即可
加入试剂过多
会观察不到白色沉淀
5盐酸小檗碱的提取方法较多，小檗碱的提取方法主要有溶剂回流法（包括水或水－有机溶剂法、醇－酸水－有机溶剂法、碱化有机溶剂法）、离子交换树脂法、沉淀法等。但本人认为溶剂回流法较其他方法设备简单，耗时较短，成本低，提取率高，可以适用于生产及药学专业学生实习采用。同时可以正交实验设计法研究最佳提取条件。
篇五：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
有机化学实验薄层色谱实验报告
【实验目的】
学习薄层层析的基本原理和分离鉴别有机化合物的操作方法。
【实验重点和难点】
学习薄层色谱法的原理及方法。
【实验类型】
基础性
【实验学时】
4学时
【实验装置和药品】
主要实验仪器：4块显微载玻片50mL烧杯
分液漏斗
布氏漏斗
研钵
烘箱
吸管
玻璃板点样毛细管、大头针、直尺、玻棒
无水硫酸钠
主要化学试剂：95%乙醇
石油醚（60-900C）
丙酮
乙酸乙酯
菠菜叶
0.5%羧甲基纡维素钠(CMC)水溶液
硅胶G【实验装置图】
【实验原理】
薄层色谱（thinlayerchromatography，缩写TLC）
薄层色谱又叫薄板层析，是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术，属固-液吸附色谱，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点，一方面适用于少量样品（几到几微克，甚至0.01微克）的分离；另一方面在制作薄层板时，把吸附层加厚加大，又可用来精制样品，此法特别适用于挥发性较小或较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物质。此外，薄层色谱法还可用来跟踪有机反应及进行柱色谱之前的一种“预试”。
薄层层析法是一种微量快速的分析分离方法。它具有灵敏、快速准确等优点。
薄层层析的原理和柱层析一样，属于固一液吸附层析的类型。通常是把吸附剂放在玻璃板上成为一个薄层，是为固定相，以有机溶剂作为流动相。实验时，把要分离的混合物滴在薄层析的一端，用适当的溶剂展开，当溶剂流经吸附剂时，由于各物质被吸附的强弱不同，就以不同的速率随着溶剂移动。展开一定时间后，让溶剂停止流动，混合物中各组分就停留在薄层析上显示出一个个色斑的色谱图。若各组分无色，可喷洒一定的显色剂使之显色。
它是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（即分配）的不同，或其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组分分开。
它是近年来发展起来的一种微量快速而简单的色谱法，它兼备了柱色谱和纸色谱的优点。
最典型的薄层色谱法是在一块洗净干燥的玻璃片上均匀铺上一薄层吸附剂，制成薄层板。用毛细管将样品溶液点在起点处，把此薄层板置于盛有溶剂的容器中，待溶液到达前沿后取出，晾干，显色，测定色斑的位置。由于层析是在薄层板上进行，故称为薄层层析。
记录原点至主斑点中心及展开剂前沿的距离，计算此移值（Rf）：
Rf=溶质的最高浓度中心至原点中心的距离
/溶剂前沿
至原点中心的距离混合物中各物质在薄析上随溶剂移动的相对距离称为比移值（Rf值）。
在一定条件下，各物质具有一定的Rf值。不同物质在相同条件下，具有不同的Rf值。因此，可利用Rf值对物质进行定性鉴定。但物质的Rf值常因吸附剂的种类和活性，薄层的厚度，展开剂及温度等的不同而异。所以在鉴定的样品时，常用已知成分作对照试验，在同一个薄层板上进行层析，然后通过Rf值的比较，对物质作定性鉴定。根据斑点的面积大小和颜色的深浅的标准物的对照下还可进行定量。
【实验內容及步骤】
（一）菠菜色素的提取
称取20g洗净后，用滤纸吸干的新鲜的菠菜叶，用剪刀剪碎并与20mL乙醇拌匀，在研钵中研磨约5min，然后用布氏漏斗抽滤菠菜叶，弃去滤液。将菠菜汁放回研钵，每次用20mL3:2的石油醚—乙醇混合液萃取2次，每次需加以研磨并且抽滤，合并深绿色萃取液，转入分液漏斗，每次用10mL水洗涤两次，弃去水—乙醇层，石油醚层用无水硫酸钠干燥水后，滤入圆底烧瓶，在水浴上蒸去大部分石油醚至体积约为1mL为止。
（二）薄层板的制备
取7.5×2.5cm左右的载玻片5块，洗净晾干。
在50mL烧杯中放置3g硅胶G，逐渐加入0.5%羧甲基纡维素钠(CMC)水溶液8mL，调成均匀的糊状，用滴管吸取此糊状物，涂于上述洁净的载玻片上。
用手将带浆的玻片在玻璃板或水平的桌面上做上下轻微的颠动，并不时转动方向，制成簿层均匀，表面光洁平整的簿层板。涂好硅胶G的簿层板置于水平的玻璃板上，在室温放置0.5h干燥后后，放入烘箱中，缓慢升温至110℃（目的是活化），恒温0.5h，取出稍冷后置于干燥器中备用。
1.
点样
取2块用上述方法制好的薄层板，分别在距一端1cm处用铅笔轻轻划一横线作为起始线。取管口平整的毛细管扦入样品溶液中，在一块板的起点线上点上述提取液样品。如果样品的颜色较浅，可重复点样，重复点样前必须待前次样品干燥后进行，样点直径不应超过2mm。
2.
展开
展开剂：
（a）石油醚---丙酮=8:2（体积比）
（b）石油醚---乙酸乙酯=6:4（体积比）
待样点干燥后，小心放入巳加入展开剂的250ml广口瓶(或小烧杯)中进行展开。点样板一端应浸入展开剂0.5cm。盖好瓶塞，观察展开剂前沿上升至离板的上端1cm处取出，尽快用铅笔在展开剂上升的前沿处划一记号，在空气中晾干后观察分离的情况，分别用展开剂a和b展开，比较不同展开剂系统的展开效果。
3.
显色：（本次实验不显示）
展开完毕，取出薄层板，划出前沿线。如果化合物本身有顔色，就可直接观察它的斑点；如果本身无色，可先在紫外灯下观察有无荧光斑点，用小针在薄层上划出斑点的位置；也可在溶液蒸发前用显色剂喷雾显色。不同类型的化合物需选用不同的显色剂。凡可用于纸色谱的显色剂都可用于薄层色谱，薄层色谱还可使用腐蚀性的显色剂。如浓硫酸、浓盐酸和浓磷酸等。
一．
实验注意事项：
1.本实验关键在于薄层板的制备要好。要求平滑均匀，即不应有纹路、带团粒，也不应有能看见玻璃的薄涂料点。
2.点样用的毛细管必须专用，不得弄混，点样时，使毛细管液面刚好接触到薄层即可。
3.点样时注意样点不能过大,切勿点样过重而使薄层破坏。
4.展开时注意观察样点的移动情况。
5.仔细测量移动的距离，计算Rf值
【实验相关內容】
(一)薄层色谱概念
除了固定相的形状和展开剂的移动方向不同以外，薄层色谱和柱色谱在分离原理上基本相同。由于薄层色谱操作简单，试样和展开剂用量少，展开速度快，所以经常被用于探索柱色谱分离条件和监测柱色谱过程。
(二)薄层色谱条件
1.固定相选择
柱色谱中提到的吸附剂都可以用作为薄层色谱的固定相，分离性能及使用选择同柱色谱的选择原则相同。
一般用于薄层色谱时，要求吸附剂的粒度更小。商品吸附剂区分为色谱级（用于柱色谱）和薄层色谱级（用于薄层色谱）。
2.展开剂选择
薄层色谱展开剂的选择和柱色谱一样，主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的极性越大，对化合物的洗脱力也越大。（各种溶剂极性见。
选择展开剂时，除参照表列溶剂极性来选择外，更多地采用试验的方法，在一块薄层板上进行试验
①若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的极性过强；
②若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点上，此溶剂的极性过弱。
当一种溶剂不能很好地展开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂。先用
一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物，若展开不好，用极性较大的溶剂与前一溶剂混合，调整极性，再次试验，直到选出合适的展开剂组合。合适的混合展开剂常需多次仔细选择才能确定。
3.相对移动值：
在不同的展开条件下，各化合物的移动距离不会相同，而在同一条件下，相对于展开剂的移动距离，各化合物有可比较的展开数据，称为相对移动值，或比移值：
Rf=lI/lo
在相同条件下测得的比移值可以用于化合物的薄层色谱特征值进行比较对照。
4.显色：
分离的化合物若有颜色，很容易识别出来各个样点。但多数情况下化合物没有颜色，要识别样点，必须使样点显色。通用的显色方法有碘蒸气显色和紫外线显色。
①碘蒸气显色：将展开的薄层板挥发干展开剂后，放在盛有碘晶体的封闭容器中，升华产生的碘蒸气能与有机物分子形成有色的缔合物，完成显色。
②紫外线显色：用掺有荧光剂的固定相材料（如硅胶F，氧化铝F等）制板，展开后在用紫外线照射展开的干燥薄层板，板上的有机物会吸收紫外线，在板上出现相应的色点，可以被观察到。
有时对于特殊有机物使用专用的显色剂显色。此时常用盛有显色剂溶液的喷雾器喷板显色。
(三)薄层色谱操作：
1.点样
将试样用最少量展开剂溶解，用毛细管蘸取试样溶液，在薄层板上点样。在样点上轻轻画出一条平行于玻璃板底边的细线。薄层色谱板载样量有限，勿使点样量过多。
2.展开
吹干样点，竖直放入盛有展开剂的有盖展开瓶中。展开剂要接触到吸附剂下沿，但切勿接触到样点。盖上盖子，展开。待展开剂上行到一定高度（由试验确定适当的展开高度），取出薄层板，再画出展开剂的前沿线。
3.显色，计算Rf值
挥发干展开剂，选择合适的显色方法显色。量出展开剂和各组分的移动距离，计算各组分的相对移动值。
篇六：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连及香连丸中盐酸小檗碱的含量文欣欣,刘丹华,余陈欢,吴巧凤
【摘要】
目的
成立黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量测定方式。方式
样品经提取、薄层展开后,采纳薄层色谱-荧光分光光度法对黄连和香连丸中盐酸小檗碱进行含量测定,展开剂为苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶∶∶,激发波长Ex＝365nm,发射波长Em＝409nm。结果
盐酸小檗碱在～
μg范围内线性关系良好,r＝3。黄连的回收率为%,RSD＝%。香连丸的回收率为%,RSD＝%。结论
该法操作简便,分离成效好,灵敏度高。
【关键词】
黄连；香连丸；荧光分光光度法；盐酸小檗碱；含量测定
Keywords：CoptischinensisFranch.；XianglianPills；fluorescencespectrophotometry；berberinehydrochloride；contentdetermination
黄连为毛茛科植物黄连(CoptischinensisFranch.)、三角叶黄连(CoptisdeltoidesetHsiao)或云连(CoptisteetaWall.)的干燥根茎,具有清热燥湿、抗菌消炎、利胆等功效,临床上用于医治消化
道感染、泻痢等疾病。以黄连作原料的中成药香连丸气微、味苦,具有清热燥湿、行气止痛等功效,临床多用于湿热痢疾、里急后重、腹痛泄泻、菌痢、肠炎等症。盐酸小檗碱为二者共有的有效成份,具有抗菌、抗病毒、抗凝等作用,医治原发性高血压、糖尿病等疾病。本实验采纳薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量,为其质量操纵提供依据。
1仪器与试药
RF-5000荧光分光光度计(日本岛津),UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂),AG135(四川时运成套仪器),80-2离心沉淀器(上海手术器械厂),CQ-250超声波清洗机(昆山市超声仪器)。
盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所,批号0713-9906)；黄连(贵州,批号；四川,批号、)。药材经本校资源鉴定教研室姚振生教授鉴定为黄连CoptischinensisFranch.；香连丸(湖北诺告捷制药,批号06100一、070101；湖北瑞华制药有限责任公司,批号060117)。硅胶G(青岛海洋化工,批号050428)；其他试剂均为分析纯。
2方式与结果
对照品溶液和供试品溶液的制备
周密称定干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品mg,置于10mL容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,得浓度为mg/mL的对照品溶液。
取黄连药材粗粉约g,周密称定,置100mL容量瓶中,加盐酸-甲醇(1∶100)溶液约95mL,60℃水浴加热15min,掏出,超声处置30min,室温放置留宿,加甲醇至刻度,滤过,滤液作为黄连供试品溶液[1]。
周密称取香连丸约g,加适量盐酸-甲醇(1∶100)溶液,索式回流提取至无色,提取液置水浴上蒸至约20mL,定量转移至50mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为香连丸供试品溶液[2]。
薄层分析条件[3]
用%CMC-Na为粘合剂自制硅胶G板,取对照品溶液适量,点样后用氨水饱和30min,以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶∶∶为展开剂,展距10cm,晾干后置紫外光(365nm)下检视,盐酸小檗碱呈黄绿色荧光斑点(Rf＝。
荧光条件的确信
取对照品溶液,用荧光分光光度计扫描,结果显示,盐酸小檗碱最
大激发波长Ex＝365nm,最大发射波长Em＝409nm。
取对照品溶液1mL,别离加入不同体积的1mol/LNaOH溶液,并用甲醇定容至2mL,在Ex＝365nm、Em＝409nm处测定其荧光强度。结果说明,随着NaOH量的增加,其荧光强度不断增大,当加入50μL时荧光强度最大,尔后继续增加NaOH用量时其荧光强度转变不大。故实验中确信NaOH加入量为50μL。
线性关系考察
别离吸取对照品溶液、、、、、μL,距离cm依次点于同一硅胶G板上,按“”项下条件展开,将相应斑点刮入离心管中,同行空白。各斑点用甲醇洗脱并将洗脱液依次转移至2mL容量瓶中,加入1mol/LNaOH溶液50μL,甲醇定容,摇匀,在Ex＝365nm、Em＝409nm处测定荧光强度,以荧光强度为纵坐标,盐酸小檗碱含量为横坐标,得回归方程为：Y＝－,r＝3,说明盐酸小檗碱在～
μg范围内荧光强度与其含量线性关系良好。
周密度实验
同板周密度
周密吸取对照品溶液10μL,点于同一硅胶G板上,呈等距离的6个点,按“”项下方式测定,结果RSD＝%。
异板周密度
周密吸取对照品溶液10μL,点于6个不同的硅胶G板上,按“”项下方式测定,结果RSD＝%。
稳固性实验
取同一份对照品洗脱液,每隔20min测定一次荧光强度,持续测定7次,结果RSD＝%,说明盐酸小檗碱在该条件下2h内稳固性良好。
重复性实验
取黄连(批号)和香连丸(批号061001)各5份,按“”项下方式提取,并按“”项下方式测定,结果黄连中盐酸小檗碱平均含量为%,RSD＝%；香连丸中盐酸小檗碱平均含量为%,RSD＝%。说明本法重复性良好。
样品含量测定
周密吸取对照品溶液及黄连、香连丸提取液各10、20、10μL,别离点于同一硅胶板上,按“”项下条件展开,将相应斑点刮入离心管中,加入甲醇mL,振摇5min,超声15min,3000r/min离心10min,
取上清液,置2mL容量瓶中,加入1mol/LNaOH溶液50μL,甲醇定容,摇匀,测定其荧光强度,平行测定3次。结果见表1。表1黄连和香连丸中盐酸小檗碱含量测定结果(略)
加样回收率实验
周密称取已知含量的黄连约g(批号)及香连丸约g(批号061001),各6份,别离加入适量的盐酸小檗碱对照品溶液,按“”及“”项下方式操作,测定其含量,计算回收率,结果见表2。表2黄连和香连丸中盐酸小檗碱加样回收率实验结果(略)
3讨论
本实验曾别离采纳乙醇和盐酸-甲醇(1∶100)溶液对样品进行提取,结果发觉,采纳乙醇提取时,小檗碱提取率不佳,在本实验薄层展开条件下,难以达到理想的分离成效；而采纳盐酸-甲醇(1∶100)溶液提取时,黄连及香连丸中小檗碱与盐酸反映形成生物碱盐,使其溶解度增加,提取较为完全,且在本实验薄层展开条件下能较好的分离,应选用盐酸-甲醇(1∶100)溶液作为提取溶剂。
目前,盐酸小檗碱的含量测定方式有薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法等[4-5],由于本实验样品成份复杂,干扰较大,
采纳薄层色谱法、紫外分光光度法进行含量测定往往背景干扰大,重现性差；而高效液相色谱法易造成色谱柱的钝化。荧光分光光度法具有灵敏性高、选择性强、实验样品量少、设备简单的特点,适用于痕量成份的检测。本实验采取薄层色谱-荧光分光光度法,能够减少盐酸小檗碱衍生物等成份的干扰,简便、有效、回收率高,适用于黄连和香连丸的质量操纵。
【参考文献】
1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,.
[2]周华平,宋广聪,王仁英.薄层扫描法测定香连丸中盐酸小檗碱的含量[J].基层中药杂志,2000,14(5)：15－16.
[3]杨广德,杨二库,王嗣岑.薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连中小檗碱的含量[J].西北药学杂志,2000,15(4)：159.
[4]梁生旺.中药制剂分析[M].北京：中国中医药出版社,－118.
[5]桑
媛,张冬海.黄柏胶囊中小檗碱含量的分光光度分析[J].中国药业,2006,15(5)：50.
篇七：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
关于薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连及香连丸中盐酸小檗碱的含量【摘要】
目的
建立黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法
样品经提取、薄层展开后，采用薄层色谱-荧光分光光度法对黄连和香连丸中盐酸小檗碱进行含量测定，展开剂为苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)，激发波长Ex＝365nm，发射波长Em＝409nm。结果
盐酸小檗碱在0.473～3.784μg范围内线性关系良好，r＝0.9993。黄连的回收率为99.03%，RSD＝1.86%。香连丸的回收率为97.10%，RSD＝1.09%。结论
该法操作简便，分离效果好，灵敏度高。
【关键词】
黄连；香连丸；荧光分光光度法；盐酸小檗碱；含量测定
Keywords：CoptischinensisFranch.；XianglianPills；fluorescencespectrophotometry；berberinehydrochloride；contentdetermination
黄连为毛茛科植物黄连(CoptischinensisFranch.)、三角叶黄连(CoptisdeltoidesC.Y.ChengetHsiao)或云连(CoptisteetaWall.)的干燥根茎，具有清热燥湿、抗菌消炎、利胆等功效，临床上用于治疗消化道感染、泻痢等疾病。以黄连作原料的中成药香连丸气微、味苦，具有清热燥湿、行气止痛等功效，临床多用于湿热痢疾、里急后重、腹痛泄泻、菌痢、肠炎等症。盐酸小檗碱为两者共有的有效成分，具有抗菌、抗病毒、抗凝等作用，治疗原发性高血压、糖尿病等疾病。本试验采用薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连和香连丸中盐酸小檗碱的含量，为其质量控制提供依据。
1仪器与试药
RF-5000荧光分光光度计(日本岛津)，UV-1型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)，AG135(四川时运成套仪器有限公司)，80-2离心沉淀器(上海手术器械厂)，CQ-250超声波清洗机(昆山市超声仪器有限公司)。
盐酸小檗碱对照品(中国药品生物制品检定所，批号0713-9906)；黄连(贵州，批号20060424；四川，批号20060827、20070422)。药材经本校资源鉴定教研室姚振生教授鉴定为黄连CoptischinensisFranch.；香连丸(湖北诺得胜制药有限公司，批号061001、070101；湖北瑞华制药有限责任公司，批号060117)。硅胶G(青岛海洋化工有限公司，批号050428)；其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2.1对照品溶液和供试品溶液的制备
精密称定干燥至恒重的盐酸小檗碱对照品4.73mg，置于10mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为0.473mg/mL的对照品溶液。
取黄连药材粗粉约0.1g，精密称定，置100mL容量瓶中，加盐酸-甲醇(1∶100)溶液约95mL，60℃水浴加热15min，取出，超声处理30min，室温放置过夜，加甲醇至刻度，滤过，滤液作为黄连供试品溶液[1]。
精密称取香连丸约0.4g，加适量盐酸-甲醇(1∶100)溶液，索式回流提取至无色，提取液置水浴上蒸至约20mL，定量转移至50mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，作为香连丸供试品溶液[2]。
2.2薄层分析条件[3]
用0.3%CMC-Na为粘合剂自制硅胶G板，取对照品溶液适量，点样后用氨水饱和30min，以苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-氨水(6∶3∶1.5∶1.5∶0.5)为展开剂，展距10cm，晾干后置紫外光(365nm)下检视，盐酸小檗碱呈黄绿色荧光斑点(Rf＝0.40)。
2.3荧光条件的确定
取对照品溶液，用荧光分光光度计扫描，结果显示，盐酸小檗碱最大激发波长Ex＝365nm，最大发射波长Em＝409nm。
取对照品溶液1mL，分别加入不同体积的1mol/LNaOH溶液，并用甲醇定容至2mL，在Ex＝365nm、Em＝409nm处测定其荧光强度。结果表明，随着NaOH量的增加，其荧光强度不断增大，当加入50μL时荧光强度最大，此后继续增加NaOH用量时其荧光强度变化不大。故试验中确定NaOH加入量为50μL。
2.4线性关系考察
分别吸取对照品溶液1.0、2.0、4.0、5.0、6.0、8.0μL，间隔1.5cm依次点于同一硅胶G板上，按“2.2”项下条件展开，将相应斑点刮入离心管中，同行空白。各斑点用甲醇洗脱并将洗脱液依次转移至2mL容量瓶中，加入1mol/LNaOH溶液50μL，甲醇定容，摇匀，在Ex＝365nm、Em＝409nm处测定荧光强度，以荧光强度为纵坐标，盐酸小檗碱含量为横坐标，得回归方程为：Y＝10.337X－1.897，r＝0.9993，表明盐酸小檗碱在0.473～3.784μg范围内荧光强度与其含量线性关系良好。
2.5精密度试验
2.5.1同板精密度
精密吸取对照品溶液10μL，点于同一硅胶G板上，呈等距离的6个点，按“2.4”项下方法测定，结果RSD＝1.34%。
2.5.2异板精密度
精密吸取对照品溶液10μL，点于6个不同的硅胶G板上，按“2.4”项下方法测定，结果RSD＝2.55%。
2.6稳定性试验
取同一份对照品洗脱液，每隔20min测定一次荧光强度，连续测定7次，结果RSD＝1.50%，表明盐酸小檗碱在该条件下2h内稳定性良好。
2.7重复性试验
取黄连(批号20060827)和香连丸(批号061001)各5份，按“2.1”项下方法提取，并按“2.4”项下方法测定，结果黄连中盐酸小檗碱平均含量为8.04%，RSD＝1.49%；香连丸中盐酸小檗碱平均含量为3.47%，RSD＝2.39%。表明本法重复性良好。
2.8样品含量测定
精密吸取对照品溶液及黄连、香连丸提取液各10、20、10μL，分别点于同一硅胶板上，按“2.2”项下条件展开，将相应斑点刮入离心管中，加入甲醇1.5mL，振摇5min，超声15min，3000r/min离心10min，取上清液，置2mL容量瓶中，加入1mol/LNaOH溶液50μL，甲醇定容，摇匀，测定其荧光强度，平行测定3次。结果见表1。表1黄连和香连丸中盐酸小檗碱含量测定结果(略)
2.9加样回收率试验
精密称取已知含量的黄连约0.1g(批号20060827)及香连丸约0.4g(批号061001)，各6份，分别加入适量的盐酸小檗碱对照品溶液，按“2.1”及“2.4”项下方法操作，测定其含量，计算回收率，结果见表2。表2黄连和香连丸中盐酸小檗碱加样回收率试验结果(略)
3讨论
本试验曾分别采用乙醇和盐酸-甲醇(1∶100)溶液对样品进行提取，结果发现，采用乙醇提取时，小檗碱提取率不佳，在本试验薄层展开条件下，难以达到理想的分离效果；而采用盐酸-甲醇(1∶100)溶液提取时，黄连及香连丸中小檗碱与盐酸反应形成生物碱盐，使其溶解度增加，提取较为完全，且在本试验薄层展开条件下能较好的分离，故选用盐酸-甲醇(1∶100)溶液作为提取溶剂。
目前，盐酸小檗碱的含量测定方法有薄层色谱法、紫外分光光度法、高效液相色谱法等[4-5]，由于本试验样品成分复杂，干扰较大，采用薄层色谱法、紫外分光光度法进行含量测定往往背景干扰大，重现性差；而高效液相色谱法易造成色谱
柱的钝化。荧光分光光度法具有灵敏性高、选择性强、试验样品量少、设备简单的特点，适用于痕量成分的检测。本试验采取薄层色谱-荧光分光光度法，可以减少盐酸小檗碱衍生物等成分的干扰，简便、有效、回收率高，适用于黄连和香连丸的质量控制。
【参考文献】
1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社，2005.213.
[2]周华平，宋广聪，王仁英.薄层扫描法测定香连丸中盐酸小檗碱的含量[J].基层中药杂志，2000，14(5)：15－16.
[3]杨广德，杨二库，王嗣岑.薄层色谱-荧光分光光度法测定黄连中小檗碱的含量[J].西北药学杂志，2000，15(4)：159.
[4]梁生旺.中药制剂分析[M].北京：中国中医药出版社，2004.115－118.
[5]桑
媛，张冬海.黄柏胶囊中小檗碱含量的分光光度分析[J].中国药业，2006，15(5)：50.
篇八：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
实验报告专业班级
学号
实验课程名称
开课实验室
姓名
同组人
实验项目名称
实验时间
评分
指导老师
一、实验目的
掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。
二、实验原理
有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们得以分离。物质被分离后在图谱上的位置，常用比移值Rf表示。
R?原点至层析斑点中心的距离原点至溶剂前沿的距离f
三、实验仪器与药品
5.0cm×15.0cm硅胶层析板两块，卧式层析槽一个，点样用毛细管。
四、物理常数
名称
分子量
熔点/℃
沸点/℃
折光率/n20甲基橙
327.33
300
未确定
比重
颜色和形态
溶解度
1.6266
1.2032
橙红色鳞状晶体或微溶于水，较易精品
粉末
溶于热水，不溶于乙醇
荧光黄
332.31
未确定
未确定
未确定
-——
橙红色结晶粉末
不溶于水，乙醚，氯仿和苯，溶于碱液。
五、仪器装置图
“浸有层析板的层析槽”图
1-层析缸，2-薄层板，3-展开剂饱和蒸汽，4-层析液
六、实验步骤
（1）薄层板的制备：
称取2～5g层析用硅胶，加适量水调成糊状，等石膏开始固化时，再加少许水，调成匀浆，平均摊在两块5.0×15cm的层析玻璃板上，再轻敲使其涂布均匀。（老师代做！）
固化后，经105℃烘烤活化0.5h，贮于干燥器内备用。
精品
（2）点样。
在层析板下端2.0cm处，（用铅笔轻化一起始线，并在点样出用铅笔作一记号为原点。）取毛细管，分别蘸取偶氮苯、偶氮苯与苏丹红混合液，点于原点上（注意点样用的毛细管不能混用，毛细管不能将薄层板表面弄破，样品斑点直径在1~2mm为宜！斑点间距为1cm）
（3）定位及定性分析
用铅笔将各斑点框出，并找出斑点中心，用小尺量出各斑点到原点的距离和溶剂前沿到起始线的距离，然后计算各样品的比移值并定性确定混合物中各物质名称。
..................溶剂前沿。。。②③①。。纯混
纯染料
混合染料
斑点移动距离a（cm）
溶剂移动距离b（cm）
Rf
甲基橙
荧光黄
甲基橙
荧光黄
混合液
精品
实验注意事项
1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。
2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。
3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端0.5－1cm时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。
讨论：
七、思考题
精品
篇九：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
黄莲鉴定实验报告篇一：实验
黄连中小檗碱的提取、精制和鉴定
实验四
黄连中小檗碱的提取、精制和鉴定
一、概述
黄连系毛茛科黄连属植物黄连（coptischinensisEranch.）的干燥根茎。
黄连具有清热燥湿、清心除烦，泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱（berberine）、掌叶防己碱（palmatine）、黄连碱（jatrorrhizine）等。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床。
主要化学成分的结构及理化性质：
小檗碱为黄色针状结晶，mp为154℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，尤其是盐酸盐。盐酸盐为l：500，枸橼酸盐1：125，酸性硫酸盐1：100，硫酸盐l：30，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
NHCHO
OCH33
3OCH3
季铵式（红棕色）醇式（黄色）
醛式（黄色）
N+
OCH3
OCH3
小檗碱（黄连素）
二、实验部分
（一）实验目的
1、掌握小檗碱的结构特点和理化性质，以及一般的提取精制方法。
2、掌握旋转蒸发仪的使用。
3、熟悉盐酸小檗碱的色谱鉴定和定性鉴定方法。
（二）实验原理
1、提取原理：小檗碱为异喹啉类小檗碱，结构中的氮原子以季铵盐形式存在，显一定程度的亲水性，因此游离小檗碱能溶与水(1:20)及乙醇(1:100)，热水或热乙醇中易溶，不溶于乙醚、氯仿、苯等有机溶剂。盐酸小檗碱在沸水中溶解，在冷水中析出。
2、分离原理：小檗碱与酸所成的盐在水中的溶解度不尽相同，如硫酸小檗碱为(1:30)，酸性硫酸小檗碱为(1:100)，枸橼酸小檗碱为(1:125)，而盐酸小檗碱为(1:500)。本实验就是据游离小檗碱在水和乙醇中的溶解度较大，而其盐酸盐难溶于水的性质进行提取和精制的。
（三）实验药材、仪器与试剂
1、药材：黄连50g（每组）。
2、仪器：回流装置、水浴锅、冰箱、旋转蒸发仪、烧杯（250ml）、抽滤装置、滤纸、层析缸、滤纸、试管、电炉。
3、试剂：75%乙醇、95%乙醇、蒸馏水、10%盐酸、氯化钠、乙醇、氯仿-甲醇-1/10盐酸（1:1:1）、10%硫酸、漂白粉、10%氢氧化钠、丙酮。
（四）实验内容
1、小檗碱的提取
取黄连粗粉50g，加入400ml75%的乙醇回流1.5h，四层纱布过滤，药渣用95%乙醇300ml回流1h，四层纱布过滤，并用少量蒸馏水洗涤药渣，合并两次滤液和洗液，放于冰箱中。
2、小檗碱的浓缩
用旋转蒸发仪将小檗碱提取液浓缩至糖浆状（小于50ml，无醇味）。
3、盐酸小檗碱的制备
将浓缩液倒入100ml沸水中（换成250ml烧杯）煮沸至溶解（10min），趁热抽滤，在滤液中加10%盐酸，调制pH=2，加入氯化钠10g，放入冰箱析晶。
4、盐酸小檗碱的精制
（1）抽滤，得到盐酸小檗碱粗品。
（2）取粗品放入100ml沸水中，搅拌溶解，继续加热10min，趁热抽滤，滤液放置过夜。（滤取结晶，先用少量1%盐酸洗一次，再用少量蒸馏水洗数次，抽干，干燥后得到小檗碱精品。）
5、鉴定
（1）化学检识
①取盐酸小檗碱少许，加10%的H2SO42ml，溶解后加漂白粉少许，即显樱红
色。
②取盐酸小檗碱约50mg，加蒸馏水5ml，水浴加热，溶解后加10%氢氧化纳试液2滴，显橙色。溶液放冷过滤，取澄清滤液，加丙酮4滴，即发生浑浊。放置后，生成黄色的丙酮小檗碱沉淀。
（2）
纸层析鉴定
样品：1%醇溶液。（每组0.1g溶于10ml乙醇）
标准品：1%盐酸小檗碱醇溶液
展开剂：氯仿—甲醇—1/10MHCL(1:1:1下行)
显色：自然光下观察
（五）实验注意事项
1、提取时两次乙醇浓度不等，提醒学生不要加错。
2、漂白粉加少许即可，否则影响结果
3、纸条要保持平整，不靠壁。
（六）思考题
1、小檗碱为哪类生物碱，可以用什么方法提取？
2、回流与蒸馏的区别是什么？
3、小檗碱精制的原理是什么？
4、旋转蒸发仪使用时需注意哪些问题？
篇二：实验三
黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
实验三
黄连中盐酸小檗碱的提取分离与鉴定
小檗碱又称黄连素，是在高等植物中分布比较广泛的、有明显生理活性的化学成分。主要存在于黄连、黄柏、三颗针等中草药中。小檗碱具有显著的抗微生物、抗原虫的作用，临床用其盐酸盐（即盐酸黄连素）治疗细菌性感染如痢疾、急性肠胃炎、呼吸道感染等症。
黄连为毛茛科黄连属植物黄连（CoptischinensisFranch。），三角叶黄连（C。deltoideaC。Y。ChengetHsiao）或云连（C。teetoidesC。Y。Cheng）的根茎，含有小檗碱(1)、巴马汀(2)、黄连碱(3)、甲基黄连碱(4)、药根碱(5)等生物碱，其中以小檗碱含量最高，可达10%左右，小檗碱以盐酸盐的形式存在于黄连中。
目前制药工业提取小檗碱主要以三颗针为原料。三颗针来源于小檗科小檗属（Berberis）多种植物，其根皮含生物碱约2%，主要含小檗碱、小檗胺、药根碱、巴马汀等生物碱。
R1R2R3R4R5
R1OR2O
R5
￡-OR3OR4
+
3CH3H
CH2CH3CH3CH3CH3HCH2CH2CH2CH23HCH3CH3CH3H
2345
小檗碱(Berberine)属异喹啉类生物碱，自水和乙醇中结晶出来的小檗碱为黄色长针状结晶，含5个结晶水，在100℃干燥时即失去结晶水，转为棕黄色，加热至110℃时，其颜色加深变暗色。Mp.145℃至160℃即分解。
OCH3
H3N
H
OCH3
O
H
小檗胺
H3CO
H
CH3
游离小檗碱能缓缓溶于水，在热水及热乙醇中易溶，而在冷乙醇中溶解度为1：100，但难溶于苯、氯仿、丙酮等溶剂。醇式和醛式小檗碱则具有一般生物碱的通性，难溶于水，易溶于有机溶剂。
小檗碱的盐类除中性硫酸盐、磷酸盐外，一般在水中的溶解度均较小。小檗碱及其盐类在水、乙醇中的溶解度如下表：
小檗碱还能与苯、氯仿、丙酮等溶剂结合成分子缩合物，有完好的结晶状态，可作为小檗碱的识别之用。如用过量的氢氧化钠处理小檗碱盐类，使其转变为醇式小檗碱，就能与丙酮缩合成结晶型的丙酮小檗碱。
一、实验目的
1.学会从黄连中提取、精制盐酸小檗碱的方法；2.学会小檗碱的化学与色谱检识方法。
二、实验原理
利用小檗碱的硫酸盐在水中的溶解度较大，而盐酸盐几乎不溶于水的性质，先将药材中的小檗碱转变为硫酸盐用水提出；再使其转化为盐酸盐，结合盐析法降低其在水中的溶解度，制得盐酸小檗碱。
三、实验内容
（一）盐酸小檗碱的提取1.润湿
取黄连粗粉50g置烧杯中，加0.3%硫酸约10ml润湿，放置30min
2.装筒（分次装入渗漉筒并排气）3.浸渍
用0.3%硫酸浸泡过夜4.渗漉
收集9—10倍量的渗漉液
等待空余时间：
10g硅胶G+30ml(0.8%CMC-Na)研匀，铺板
（二）分离
1.取渗漉液，加40%NaOH调PH至11～12，放置过夜；
2.抽滤，将滤液加浓盐酸调PH值2～3，加入6%NaCl，搅拌均匀，放置过夜；3.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱粗品。
（三）精制
1.将上述粗品放入25倍量沸水中，于水浴上加热使溶解，趁热过滤液在65℃时加浓盐酸调PH值2～3，放置过夜
2.抽滤(尽量抽干),滤取结晶,即得盐酸小檗碱精品。
（四）检识
1.取自制精制盐酸小檗碱50mg，加水5ml，缓缓加热溶解后，加氢氧化钠试液2滴显橙红色，放冷，加丙酮4滴，即发生浑浊，放置后，生成黄色沉淀，即为丙酮小檗碱。
2.取自制精制盐酸小檗碱少许，加入稀硫酸8ml溶解，搅拌均匀，分置两支试管中，一支加漂白粉少量，即显樱红色；另一支加入2滴浓硝酸,也显樱红色。3.取自制精制
盐酸小檗碱少许，加稀硫酸12m1使溶解，分置于三支试管中，分别加入碘化汞钾试剂、碘化铋钾试剂及硅钨酸试剂，观察其产生的现象。4.盐酸小檗碱的薄层层析
吸附剂：硅胶G硬板(未活化)
样
品：①自制精制盐酸小檗碱乙醇溶液
②盐酸小檗碱标准品乙醇溶液
展开剂：①氯仿－乙醇(9:1)
②甲醇－丙酮－乙酸(4:5:1)
显色剂：先置于紫外光灯(365nm)下检视，再喷雾改良碘化铋钾试剂，观察斑点颜色，并与标准品对照。
篇三：黄连中小檗碱的提取和鉴定
化工与材料工程学院
综合与设计性化学实验
实验类型：
设计型
实验题目：黄连中小檗碱的提取和鉴定
班
级：学
号：
姓
名：
实验日期：XX-10-29
【关键词】
黄连；盐酸小檗碱；提取工艺；溶剂回流法
；化学检识檗碱
前言
黄连为毛茛科黄连属植物黄连、三角叶黄连或云连的干燥根茎。《中国药典》中黄连和盐酸小檗碱一直有收载，具有抗病原微生物、抗腹泻、抗炎和免疫促进以及降血压、抗
心律失常、降血糖等药理作用，用于急性肠胃炎、口舌生疮、烧烫伤、心率失常、高血压、糖尿病等疾病的治疗。黄连的有效成分主要是生物碱，已分离出的主要生物碱有小檗碱、掌叶防己碱、黄连碱等。其中小檗碱含量最高，可达10%左右，是以盐酸盐的状态存在于黄连中。小檗碱有很强的抗菌作用，已广泛地应用于临床，掌叶防己碱也作药用，其抗菌性能和小檗碱相似。
一
实验目的
1、通过对黄连中小檗碱的提取，掌握一般天然产物的提取技术。
2、通过对小檗碱的鉴定，掌握一般生物碱的鉴别方法。
3、熟悉握小檗碱的化学性质和鉴定方法。
4、通过查阅资料并结合所学知识，初步了解并完成实验方案的设计
二
实验原理
小檗碱为黄色针状结晶，加热至110℃变为黄棕色，于160℃分解。盐酸小檗碱加热至220℃分解，生成红棕色的小檗红碱。mp为145℃，游离的小檗碱能缓缓溶于水（1：20）及乙醇中（1：100），易溶于热水及热醇，难溶于乙醚，石油醚、苯、三氯甲烷等有机溶剂，其盐在水中溶解度很小，但在热水中都比较容易溶解。
小檗碱常以季铵碱形式存在，碱性强（pka11.53），能溶于水中，其水溶液有三种互变形式。
CHO
OCH33
3OCH3
季铵式（红棕色）醇式（黄色）
醛式（黄色）
小檗碱属于季铵碱，其游离型在水中的溶解度最大。而它们的盐类以含氧酸盐在水中溶解度较大，不含氧酸盐难溶于水，其盐酸盐在水中溶解度则更小。利用此性质结合盐析法，可从黄连中提取小檗碱。
三
实验仪器与试剂
1仪器和材料
100ml圆底烧瓶冷凝管50ml,100ml烧杯各一个
10ml,25ml量筒各一个
铁架台1个布氏漏斗滤纸
滴管一个蒸发皿
小试管3个
2试剂与原料
黄连粉（6.0g）
体积分数为95%的乙醇（60ml）
浓盐酸
蒸馏水
碘化铋钾试剂
碘化钾试剂
硅钨酸试剂
四
实验内容（操作步骤）
1提取与分离
黄连粗粉6.0g，冷凝回流1.5h
（现象：黄连粉溶解
溶液微沸
呈红棕色）
加热蒸发
加1%的醋酸40ml加热
溶解
趁热抽滤
滤液滤渣
加浓盐酸至溶液浑浊（pH=1）
静置冷却
析出黄色针状晶体
水洗2-3次
精制
小檗碱晶体
(注：由于时间有限
最后未能得到析出的晶体)
2性质与鉴定
由于没能的到晶体
所以取少量小檗碱溶液分成三份
分别加入三支试管中：
再向第一支试管加入1-2滴碘化铋钾试剂，振荡
向第二支试管加入1-2滴碘化钾试剂，振荡
向第三支试管加入1-2滴硅钨酸试剂，振荡
鉴别试验现象记录：
五.实验结果
5.1收率：由于本实验的时间有限，最终未能得到
小檗碱晶体，无法算收率
5.2性质与鉴定结果：
六
讨论
1．盐酸小檗碱在热水、热乙醇中溶解度较大，在冷水、冷乙醇中溶解度小，所以本实验在水浴中加热回流，另外可以加入NaCl促进其析出结晶。
2．在精制小檗碱时，加入醋酸加热，溶解，要趁热过滤。因为小檗碱在酸性下放冷极易析出晶体
所以迅速抽滤
提高提取率。
3鉴定试验也可以漂白粉显色反应：小檗碱酸性水溶液中加漂白粉（或通入氯气），溶液即变樱红色。另外也可以采用薄层色谱检识小檗碱。
4滴加鉴定硅钨酸试液时加入量不能过多，加入1-2滴振荡即可
加入试剂过多
会观察不到白色沉淀
5盐酸小檗碱的提取方法较多，小檗碱的提取方法主要有溶剂回流法（包括水或水－有机溶剂法、醇－酸水－有机溶剂法、碱化有机溶剂法）、离子交换树脂法、沉淀法等。但本人认为溶剂回流法较其他方法设备简单，耗时较短，成本低，提取率高，可以适用于生产及药学专业学生实习采用。同时可以正交实验设计法研究最佳提取条件。
篇十：黄连粉的薄层色谱鉴别实验报告
实验报告专业班级
学号
实验课程名称
开课实验室
姓名
同组人
评分
指导老师
实验项目名称
实验时间
一、实验目的
掌握薄层色谱的基本原理及其在有机物分离中的应用。
二、实验原理
有机混合物中各组分对吸附剂的吸附能力不同，当展开剂流经吸附剂时，有机物各
物质被分离后在图谱上
组分会发生无数次吸附和解吸过程，吸附力弱的组分随流动相迅速向前，而吸附力弱的
组分则滞后，由于各组分不同的移动速度而使得她们得以分离。
的位置，常用比移值
Rf表示。
原点至层析斑点中心的距离
Rf
原点至溶剂前沿的距离
三、实验仪器与药品
5.0cmx15.0cm硅胶层析板两块，卧式层析槽一个，点样用毛细管
四、物理常数
名称
分子量
熔点/C
沸点/C
折光率
比重
颜色和形
态
溶解度
20/n
甲基橙
327.3
300
1.6266
1.203
橙红色鳞
状微溶于
和2
晶体或
粉末
水，较易
定溶于热
水，不溶
于乙醇
卄、l/332.3
橙红色结
晶不溶于
荧光黄
未确定
未确定
未确定
粉末
水，乙
醚，氯仿
和苯，溶
于碱液。
五、仪器装置图
“浸有层析板的层析槽”图
1-层析缸，2-薄层板，3-展开剂饱和蒸汽，4-层析液
六、实验步骤
(1)
薄层板的制备：
称取2?5g层析用硅胶，加适量水调成糊状，等石膏开始固化时，再加少许水，调
成匀浆，平均摊在两块5.0X15cm的层析玻璃板上，再轻敲使其涂布均匀。(老师代做！)固化后，经105C烘烤活化0.5h，贮于干燥器内备用。
(2)
点样。
在层析板下端2.0cm处，(用铅笔轻化一起始线，并在点样出用铅笔作一记号为原
点。)取毛细管，分别蘸取偶氮苯、偶氮苯与苏丹红混合液，点于原点上
(注意点样用
的毛细管不能混用，毛细管不能将薄层板表面弄破，样品斑点直径在
1~2mm为宜！斑
点间距为1cm
(3)
定位及定性分析
用铅笔将各斑点框出，并找出斑点中心，用小尺量出各斑点到原点的距离和溶剂前沿到
起始线的距离，然后计算各样品的比移值并定性确定混合物中各物质名称。
........
溶剂前沿
00
f①
JI
纯混
T
纯染料
混合染料
甲基橙
:甲基橙:
荧光黄
荧光黄
混合液
斑点移动距离a
(cm)
溶剂移动距离b
(cm)Rf
实验注意事项
1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地
方。
2、点样时点要细，直径不要大于
2mm间隔0.5cm以上，浓度不可过
大，以免出现拖尾、混杂现象。
3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表
面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂
以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端0.5-1cm出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。
讨论：
七、思考题
0.5cm
时要及时将板取
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